TurboTEV蛋白酶是一种来自烟草蚀刻病毒（TEV）N1a蛋白的增强型半胱氨酸蛋白酶，能够识别特定的切割位点Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly，并在Gln和Gly之间进行切割。此酶在4°C下展现出极强的活性，具备高特异性及优越的稳定性，无需特定缓冲液，可在最适合目标蛋白的环境中发挥作用。TurboTEV蛋白酶的分子量为52kDa，携带GST和His标签，这样便于通过Ni螯合树脂或谷胱甘肽（GSH）树脂轻松去除剪切标签。

**来源及活性**： - 来源：大肠杆菌 - 活性：>10单位/µg。1单位TurboTEV蛋白酶在30°C条件下可在1小时内裂解3µg底物的85%。

**使用说明**： 1. **蛋白质裂解**： A. 准备新鲜的冷透析缓冲液（示例：25mM Tris-HCl, pH 8.0, 150-500mM NaCl, 14mM β-巯基乙醇）。 B. 将目标蛋白样品稀释至1-2 mg/mL，并准备一小份未切割样品用于后续分析。 C. 根据1:100（w/w）的比例加入TurboTEV蛋白酶，例如100mg目标蛋白对应10000单位（1mg）TurboTEV蛋白酶。 D. 在4°C下用透析缓冲液透析，时间约为16小时。 2. **去除TurboTEV蛋白酶**： A. 上柱进行纯化。 B. 进行SDS-PAGE分析（可选）。

**产品应用**： - 实现蛋白裂解； - 从重组蛋白中去除融合标签； - 用于蛋白质和肽的纯化。

**常见问答**： 1. 问：TEV消化反应中缓冲液条件有多重要？某些成分是否会影响TurboTEV的剪切效率？ 答：不推荐使用10%甘油、20mM组氨酸、500mM NaCl和100mM Tris-HCl。1mM DTT可以接受。 2. 问：剪切之前是否需要缓冲液交换？ 答：这可能是必要的。

**参考文献**： - Hyeok-Jin Ko et al. (2012). Functional Cell Surface Display and Controlled Secretion of Diverse Agarolytic Enzymes by Escherichia coli. - Jussi J. Joensuu et al. (2010). Hydrophobin Fusions for High-Level Transient Protein Expression and Purification in Nicotiana benthamiana. - Neef et al. (2015). Versatile Vector Suite for the Extracytoplasmic Production and Purification of Heterologous His-Tagged Proteins in Lactococcus lactis.

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